关于离子交换色谱仪的原理以及实际操作介绍

离子交换色谱仪是由不溶于水的网状结构聚合物骨架组成的。骨架上有许多共价结合的带电基团。如果侧链是带正电荷的基团，它可以与带负电荷的离子结合。它被称为阴离子交换器，吸附带负电荷的蛋白质。强离子交换树脂在较宽的pH范围内被电离，而弱离子交换树脂仅在较窄的pH范围内被电离。

大多数重组蛋白是通过离子交换纯化的。离子交换色谱法是一种高分辨率的色谱法，可直接放大用于工业应用。柱再生容易，蛋白质可以浓缩，因此阴离子交换色谱法是应用最广泛的。

2. 离子交换色谱法介质选择

对于离子交换介质必须首先考虑目标分子的大小，因为它会影响介质对目标分子的动载荷，从而影响其分离。

3.移动相的选择

离子交换色谱的流动相必须解决一定离子强度和一定的缓冲能力博士为了避免靶蛋白的失活，缓冲溶液可用于稳定流动相的pH值，以便它不会改变明显在色谱过程中，与此同时，它可以稳定在目标分子的电荷，并确保色谱结果的重要性。缓冲溶液一般按以下原则选择：应选择阴离子缓冲溶液作为阳离子交换剂.

4.色谱柱的选择

离子交换色谱通常采用短粗色谱柱，即高径比小的色谱柱。

5.离子交换色谱常见的问题

1、如果提纯后的样品纯度不高怎么办？

如果目标蛋白与杂化蛋白等电点差较大，则通过穿透步骤获得目标蛋白。

2、样品太粘怎么办？

如果样品太厚，可能是因为含有过多的蛋白质或含有分子量较大的核酸分子。通常有以下几种解决方案：提高机械细胞裂解效率；降低样品流速。

以上就是有关于仪的原理以及实际操作介绍，我们公司是专业生产气相色谱质谱仪、、制备液相色谱仪等仪器厂家，目前受到很多客户的好评。